[00075836]一种植物质体表达载体的构建方法及应用
联系人： 高小龙
所在地：湖北 武汉市
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技术详细介绍
摘要：本发明公开了一种植物质体表达载体的构建方法及应用，构建了gfp表达盒和aadA表达盒，把去除多克隆位点的质粒pBluescript II sk(+)载体片段、gfp表达盒、aadA表达盒、与质体基因组同源的左同源片段和右同源片段这5个片段通过无酶克隆技术一步转入大肠杆菌中，验证正确的载体命名为pYY12。利用金粉包裹pYY12质粒DNA导入质体基因组中，Southern blot证实目的基因导入质体基因组中，Northern bolt显示了GFP基因的转录水平，激光共聚焦显微镜证实了GFP的存在位置，SDS‑PAGE法分析了GFP蛋白的高水平的积累量，达到总可溶性蛋白的9％左右。
