[00075834]一种离体高效构建多拷贝解脂耶氏酵母表达载体及其应用方法
联系人： 高小龙
所在地：湖北 武汉市
- 服务承诺
- 产权明晰
-
资料保密
对所交付的所有资料进行保密
- 如实描述
技术详细介绍
摘要：本发明提出一种离体高效构建多拷贝解脂耶氏酵母表达载体及其应用方法，重组表达载体步骤为：设计4条引物，分别加在pINA1296载体的启动子上游和终止子下游，分别PCR扩增包括以启动子和终止子为区域的小片段及以载体的其他框架为区域的大片段，经回收纯化后，转化大肠杆菌XL10-Gold；验证重组子，得用于多拷贝解脂耶氏酵母表达载体pINA1296I。应用方法为：选择需表达的目的基因，将目的基因插入pINA1296I载体中，组成新的含有目的基因的单拷贝重组质粒pINA1296I-xxx-A1。再利用生物砖方法来实现体外串联多拷贝目的基因，pINA1296I-xxx-A2，pINA1296I-xxx-A3，pINA1296I-xxx-A4等。本发明安全、简单、易操作，可以提高目的蛋白的表达量。
