[00004652]一种利用固定化酶筛选I型17β羟类固醇脱氢酶抑制剂的方法
联系人： 张甜
所在地：江苏 南京市
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技术详细介绍
本发明提供了一种利用固定化酶筛选I型17β羟类固醇脱氢酶抑制剂的方法，属酶学与酶工程技术领域。I型17β羟类固醇脱氢酶(17β‑HSD1)在治疗激素依赖性疾病中发挥重要作用。目前，研究17β‑HSD1活性主要以底物放射性标记法为主，但是由于17β‑HSD1游离酶容易失活，且17β‑HSD1制备不易，每次新药筛选实验均需要新鲜胎盘来制备酶源，原材料获取不易，价格昂贵，给新药筛选工作带来困难。本发明，采用氨基修饰的硅球为载体，利用戊二醛交联法，固定从胎盘中提取的17β‑HSD1，建立体外固定化17β‑HSD1酶模型，以雄烯二酮为底物，使用高效液相色谱法检测产物，筛选17β‑HSD1潜在抑制剂。该方法，克服了游离酶的不稳定性，操作简单，制作成本低廉，可重复利用。
