本发明属于药物化学与医药技术领域,公开了一种吡喃并[3,2-a]吩嗪衍生物及其制备方法和在制备抗肿瘤药物中的应用。该吡喃并[3,2-a]吩嗪衍生物如结构式(I)所示,其中R
1为H、卤素、-OCH
3或-NO
2;R
2为H、卤素、-OCH
3或-NO
2;R
3为H、-CH
3、-C
2H
5、-CH(CH
3)
2、卤素、-OH、-OCH
3、-N(CH
3)
2、-N(C
2H
5)
2或-NO
2;R
4为H、卤素或-OCH
3;R
5为H、卤素或-OCH
3;X为-CN或-COOC
2H
5。本发明同时公开了该吡喃并[3,2-a]吩嗪衍生物的制备方法及其在制备抗肿瘤药物中的应用,该类化合物对DNA拓扑异构酶有强抑制作用,对多种肿瘤细胞株具有显著的抑制活性,在制备抗肿瘤药物上具有巨大的应用潜力。