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本发明公开了一种同时标记肿瘤 IV 型胶原、巨噬细胞和新生血管的方法, 其步骤: 1、组织切片, 固定于经多聚赖氨酸处理的防脱载玻片上; 2、将组织切片放入二甲苯中脱蜡; 3、抗原修复; 4、洗涤切片; 5、封闭; 6、加一抗; 7、洗涤切片; 8 封闭, 同步骤 4; 9、用二抗为量子点 QDs525 标记的山羊抗鼠免疫球蛋白 G 的抗原结合片段 F(ab′)2-QDs525、量子点QDs585 标记的山羊抗兔免疫球蛋白 G 的抗原结合片段 F(ab′)2-QDs585、量子点 QDs655 标记的兔抗山羊免疫球蛋白 G 的抗原结合片段 F(ab′)2-QDs655, 去除封闭液后, 滴加混合物;10、洗涤切片; 11、封片, 用甘油和 TBS10ml 配成缓冲甘油, 缓冲甘油封片后保存。本发明用于肿瘤组织微环境多种成分的高效、准确、快速、同时检测。
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