[00024134]耐热菌的ELISA快速检测方法
联系人： 董维权
所在地：陕西 西安市
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技术详细介绍
一、发明创造简介
目前，国内外对苹果浓缩汁(AJC)中耐热菌检测的通用方法是细菌平皿培养记数法，检测周期为4-5天，不能及时有效控制产品质量安全。国内，陕西师范大学研究人员建立了耐热菌的PCR及QC-PCR快速检测方法，达到了快速、特异，但对设备和实验条件要求高，步骤较繁锁，推广应用较困难。本发明公开了一种耐热菌的ELISA快速检测方法，其原理是采用免疫分析化学的原理，其技术路线是：捕集目标菌→包被酶标板→封闭酶标板→加一抗（耐热菌多克隆抗体）→再加二抗（酶标山羊抗兔抗体）→加底物工作液反应15分钟后→加终止液终止反应→酶标仪测定。本检测方法简便、易行，适合于实验室及现场检测，检测限可达国际标准及我国标准中对苹果浓缩汁样品中热菌要求不超过1CFU/10mL, 整个操作过程可以在24小时内完成（包括预增菌），可成功用于果汁中耐热菌的快速检测。
二、创新点
1．首次建立了耐热菌的酶联免疫检测方法。
2．可成功应用于果汁中耐热菌的快速检测。
三、发明的应用价值和市场前景
本发明主要应用于浓缩苹果汁中耐热菌的间接ELISA检测，也适用于其他果汁或其他食品中耐热菌的快速检测。仅具有规模的果汁厂，我国目前就有近100家，年生产苹果浓缩汁60多万吨，耐热菌常常超标，为果汁厂必检项目。本发明建立的耐热菌ELISA快速检测方法，能在24 h内实现对耐热菌的快速检测。为将检测结果可及时反馈生产线，以有效控制果汁质量安全，具有很高的应用价值和市场前景。
