[00020621]OGP-AcAP2融合蛋白转基因工程菌株

　　当前，我国已进入老龄社会，骨质疏松患者病例逐年增加，而骨折又是创伤学中最常见最多发的疾病。成骨生长肽（OGP）是一种由14个氨基酸组成的小肽，具有促进体外成骨细胞增殖、体内成骨及刺激造血等功能。OGP能增加细胞的Ⅰ型胶原mRNA表达，增加碱性磷酸酶活性、胶原合成和钙盐沉积。对于骨折的愈合，骨质疏松症，急、慢性贫血病的预防和治疗及其在肿瘤放、化疗过程中刺激骨髓细胞造血的作用，已经得到高度的重视和肯定[4]。因此，采用基因工程技术开发、生产成骨生长肽将具有相当高的临床应用价值和重要的现实意义，具有广阔的前景。

　　AcAPc2(10KD)是Xa因子的高效特异抑制剂。据报道Xa抑制剂的抗血栓效果优越于凝血酶抑制剂，AcAPs作为Xa因子的高效特异抑制剂对血小板聚集功能影响甚小,用于抗血栓治疗时引发出血的危险性小。1998年,Donnelly等报道AcAPs在体内还具有抗肿瘤细胞转移的作用。AcAPs的抗凝血、抗血栓作用,有可能成为临床上一种新的抗凝剂和抗血栓治疗药物。我们用分子生物学的方法及根据表达系统的特点选择CHO-dhft-偏爱密码子合成AcAPc2的全长cDNA序列包括信号肽的基因(315bps),用基因工程方法成功构建了高效分泌表达AcAPc2的中国仓鼠(CHO)卵巢基因工程细胞株，并对其产物的活性进行了研究。

　　AcAPc2通过抑制凝血途径的fVIIa/TF复合物发挥抗凝作用, rAcAPc2在人体内具有长的半衰期(大于50h)。rAcAPc2的半衰期长短主要与其与fXa或fX的结合亲和力有关,它能与人fX或fXa以高亲和力结合,形成稳定的复合物(Kd=640pM),特别是rAcAPc2能与fXa的酶原fX结合从而使rAcAPc2的半衰期在人体内长达50 h以上。

　　rNAPc2在预防冠脉重建手术后的血栓形成也是安全有效的。rAcAPc2还可能用于治疗肿瘤、败血病、埃博拉病毒出血热等。

　　OGP-AcAP2融合蛋白转基因工程菌株，它涉及一种融合蛋白转基因工程菌株。解决目前尚无同时有效治疗骨质疏松和血栓药品的缺陷。OGP-AcAP2融合蛋白转基因工程菌株大肠杆菌BL21(DE3-OGP/AcAPc2)。本发明可用于医药制备领域。