[00013419]利用七叶苷和4-MUG从fosmid文库中筛选β-葡萄糖苷酶的方法
联系人： 王巍
所在地：浙江 杭州市
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技术详细介绍
技术描述：
本发明公开了一种利用七叶苷和4-MUG从fosmid文库中筛选β-葡萄糖苷酶的方法：(1)从富含纤维素资源的地点采集土样，提取总DNA，构建fosmid文库，获得富集菌液；(2)将富集菌液于含七叶苷的基础培养基中，20～40℃培养12～24h进行初筛，挑取菌落周围呈现黑色的菌株接种至基础培养基中，20～40℃培养12～24h进行复筛，再将4-甲基伞形酮-β-D-葡萄糖苷的低熔点琼脂糖溶液均匀平铺在复筛平板上，20～40℃培养0.1～1h，紫外灯下观察菌落周围显荧光的，即得所述β-葡萄糖苷酶产生菌株，进而获得β-葡萄糖苷酶的DNA序列；本发明方法筛选时间短，精度高，误差少。
成果用途：本发明用于大规模从fosmid文库中筛选纤维素酶。
